AAV腺相关病毒包装
效劳先容 Service Introduction
腺相关病毒 (Adeno-associated Virus,AAV) 属于细小病毒科(parvoviridae)单链 DNA 病毒。AAV 能熏染多种细胞。是现在基因治疗首先的工具。
AAV 是一种复制缺陷型细小病毒,通常需要在辅助病毒(如腺病毒、纯粹疱疹病毒等)的辅助下才华爆发毒性熏染,天生子代 AAV。bet356体育在线生物接纳 AAV 无辅助病毒系统 (AAV Helper-Free System),在无辅助病毒的条件下生产重组腺相关病毒。在这个系统中, rep 和 cap 基因从病毒载体中被转移到辅助质粒 pAAV-RC 中,而 AAV ITRs 仍位于病毒载体中。生产 AAV 病毒颗粒所需的腺病毒基因 产品(包括 E2A,E4 等基因)大部分则由 pHelper 质粒提供,其余的腺病毒基因产品由稳固表达腺病毒 E1 基因的宿主细胞提供。在辅 助质粒的资助下,仅需两头的 ITR 就能将携带的外源片断包装进入腺相关病毒颗粒,因此,rep 和 cap 基因的转移后空出的位置可以允许 外源基因插入病毒基因组中。(AAV基因组如下图)
效劳优势 Service Advantages
清静性高:重组腺相关病毒载体 (rAAV) 源于非致病的野生型腺相关病毒。迄今为止尚未发明对人体致病的野生型 AAV,重组 AAV 在基 因组序列上去除了大部分的野生型AAV 基因组元件,进一步包管了清静性。
免疫原性低:举行动物实验时造成的免疫反应小。
宿主规模广:能熏染破碎细胞和非破碎细胞。
表达稳固:能介导外源基因体内长时间稳固表达。
物理性子稳固:可抗氯仿,在 60℃不可被灭活。
提供的效劳 Services
AAV 载体构建;
滋扰腺相关病毒(shRNA 和 miRNA)包装;
过表达腺相关病毒的包装。
提供产品
产品名称 | 病毒滴度(vg/ml) | 规格 | 比照组 | 周期 | |
过表达腺相关病毒 | 过表达腺相关病毒(<1.5k) | 1010-1012 | 1mL | 200uL(1010-1012 vg/ml ) | 4-5周 |
过表达腺相关病毒(>1.5k) | 1010-1012 | 1mL | 200uL(1010-1012 vg/ml ) | 4-5周 | |
滋扰腺相关病毒 | 1010-1012 | 1mL | 200uL(1010-1012 vg/ml ) | 4-5周 |
手艺流程 Technical Procedures
Tips
【AAV 病毒载体差别血清型】
研究发明 AAV 具有多种血清型,州差别血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳卵白差别。AAV 进入细胞前,首先要通过衣壳卵白 与细胞外貌的响应受体团结进而附着于细胞外貌,随后再通过与其它复合受体的相互作用来启始病毒颗粒的细胞内转运等生物学运动。因 此 AAV 差别血清型对差别的组织和细胞亲和性差别,体现出 AAV 血清型对差别组织器官的转染效率保存差别。现在 AAV 可分为 12 种血 清型 AAV1-AAV12。bet356体育在线生物可针对差别的组织器官类型选择响应血清型的 AAV 病毒举行包装。
差别血清型对各组织器官的亲和性 | |
组织 | 最适血清型 |
中枢组织 | AAV1,AAV2,AAV4,AAV5,AAV8,AAV9 |
心脏 | AAV1,AAV8,AAV9 |
肾脏 | AAV2 |
肝脏 | AAV7,AAV8,AAV9 |
肺 | AAV4,AAV5,AAV6,AAV9 |
胰脏 | AAV8 |
骨骼肌 | AAV1,AAV6,AAV7,AAV8,AAV9 |
感光受体细胞 | AAV2,AAV5,AAV8 |
视网膜色素细胞 | AAV1,AAV2,AAV4,AAV5,AAV8 |